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　　產(chǎn)品簡介：

　　RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞、組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解后的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA裂解液有很多配方，按效果來分主要分為強，中，弱三種。本裂解液為RIPA強裂解液，其主要成分為50mM Tris-Hcl，150mM NaCl，1 mM EDTA-Na2， 1% Triton X-100，1% sodium deoxycholate，0.1% SDS。

　　包裝內(nèi)容：

　　保存條件：

　　4℃避光保存，有效期12個月。

　　使用方法：

　　對于組織樣品：

　　1.組織塊用冷PBS洗滌，去除血污。剪成小塊置于勻漿器中。

　　2.加入10倍組織體積本試劑(使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)使用高速組織研磨儀徹底勻漿。

　　3.將勻漿液轉(zhuǎn)移至1.5mL離心管中，振蕩。冰浴30 min，期間用移液器反復(fù)吹打，確保細(xì)胞完全裂解。

　　4.12000g離心5 min，收集上清，即為總蛋白溶液。

　　對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：

　　1.對于貼壁細(xì)胞：

　　(1)用PBS沖洗細(xì)胞2-3次。*后一次徹底吸干殘留液。

　　(2)加入適當(dāng)體積的本試劑(使用前數(shù)分內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)于培養(yǎng)板、瓶內(nèi)3-5 min。期間反復(fù)晃動培養(yǎng)板、瓶，使試劑與細(xì)胞充分接觸。

　　(3)用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞及試劑刮下，收集到1.5mL離心管中。

　　2.對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，每6孔板細(xì)胞加約250 μL本試劑(在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑)，振蕩。

　　3.冰浴30 min，期間每10 min用200 μL移液器反復(fù)吹打數(shù)次，確保細(xì)胞完全裂解。

　　4.12000g離心5 min，收集上清，即為總蛋白。

　　注意事項：

　　1.對于組織樣品：每50 mg組織約加入1mL的本試劑裂解。對于軟骨、皮膚等組織，可適當(dāng)減少試劑用量，以提高蛋白濃度。

　　2.對于培養(yǎng)細(xì)胞樣品：正常細(xì)胞密度下，每個6孔板細(xì)胞加入250 μL左右裂解液。其它類推。

　　3.裂解時可能會出現(xiàn)粘稠狀。可用移液器反復(fù)吹打或渦旋儀振蕩，直至呈液狀為止。如果一直較稠，可再加入適量裂解液。

　　4.本試劑不含有蛋白酶抑制劑，有需要可另外加入配合使用。推薦使用本公司的G2006、G2007、G2008等相關(guān)蛋白酶抑制劑。

　　5.此試劑對人體有害，請適當(dāng)防護(hù)。

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